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武漢思特進(多圖)-熒光原位雜交

惰性多聚體可用來促進250個堿基以上的探針的雜交率。對單鏈探針可增加3倍,熒光原位雜交,而對雙鏈探針、隨機剪切或隨機引物標(biāo)記的探針可增加高達100倍。而短探針不需用促進劑,因其復(fù)雜度低和分子量小 ,短探針本身的雜交率就高 。*葡聚糖是一種廣泛用于較長雙鏈探針雜交的促進劑。這是一種多聚胺,平均分子量為500 000。另一種常見的促進劑是聚乙二醇(peg),peg分子量?。?000~8000)、粘度低、價格低廉,但它不能完成取代*葡聚糖。在某些條件下5%~10%*葡聚糖效果較好,若用5%~10%peg則可產(chǎn)生很高的本底。因此,使用促進劑時有必要優(yōu)化條件。
原位雜交試驗
收集斑馬魚的胚胎,在holfretor水中培養(yǎng),到達所需要的發(fā)育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%*固定,在4℃保存,二十四小時后用50%甲6醇2%*溶液洗,然后換成甲9醇,在-20c 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧6水處理,去除色素?;蛘呤褂帽斤畴逑∪芤号囵B(yǎng),可阻斷色素的形成)
原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精0準確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進行。
原位雜交(in situ hybridization)將標(biāo)記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。
使用dna或者rna探針來檢測與其互補的另一條鏈在*或其他真核細胞中的位置。
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